《姐姐，请别松开我的手》剧情发生在繁华都市的一个普通家庭。故事的主角是一对相依为命的姐弟，姐姐小芳和弟弟小杰。小芳是个坚强独立的女孩，她一边努力工作，一边照顾着年幼的弟弟。然而，命运却对他们开了一个残酷的玩笑。

一天，小芳被诊断出患有罕见且严重的疾病，生命垂危。面对即将到来的生死离别，小芳最放心不下的就是弟弟小杰。她担心自己离开后，弟弟会孤单无助。

在生命的最后时光里，小芳尽力教导小杰独立生活，并教他学会面对未来的挑战。她告诉弟弟，无论遇到什么困难，都要勇敢地面对，要坚强地活下去。最终，在姐姐小芳的鼓励和关爱下，小杰逐渐成长为一个勇敢、坚强的少年。而小芳也带着对弟弟的深深眷恋和祝福，离开了这个世界。